PROYECTO QUIMICA ORT DE GENOMA HUMANO

investigación en bioquímica molecular y proteómica 2008

Por cuarto año consecutivo, los alumnos del último año de la especialidad química de la Escuela Tecnico ORT Argentina realizarán sus proyectos finales en distintas universidades y centros de investigación, con profesionales reconocidos. La metodología de trabajo evita la transposición didáctica, permitiendo a los estudiantes, realizar su actividad final en los lugares donde se está generando el conocimiento.
La articulcion entre el nivel medio y el posgrado universitario es auspiciada por el CONICET (consejo nacional de investigacion cientifica y tecnica). Los proyectos de investigacion para el año en curso son:

1) Evaluación de la expresión de la molecula de adhesión cadherina epitelial en tejidos humanos normales y tumorales.
Investigador: Dra. Monica Vazquez-Levin.
Instituto de biología y medicina molecular ( IBYME-CONICET) .
Alumnos: Yael Dobzewicz y Gala Szapiro.
Blog: http://www.proyecto-6q.blogspot.com/

2) Accion del hexaclorobenceno (HCB) sobre la Uroporfirinógeno descarboxilasa de una línea celular de hepatocitos humanos. Mecanismo de acción .
Investigador: Dra. Maria del Carmen Rios de Molina.
Instituto: Departamento química biológica, facultad de ciencias exactas y naturales.
Alumnos: Lucas Toiw y Uriel Frid.
Blog: http://www.proyectofrid-toiw08.blogspot.com/

3) Modelos experimentales de enfermedades metabólicas: Porfiria y Síndrome Metabólico. Proteómica y Metabolómica de estos disturbios.
Investigador: Dra. Marta Blanca Mazzetti.
Instituto: Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA). Alumnos: Maria Duperron y Mauro Elencwajg.
Blog: http://www.proyectofinal6q.blogspot.com/

4) Factores no hemodinámicos relacionados con la génesis y evolución de la proteinuria durante la enfermedad renal progresiva.
Investigador: Dra. Elsa Zotta.
Instituto: Laboratorio de Fisiopatogénia, Departamento de fisiología, Facultad de medicina, UBA. Alumnos: Barbara Helueni y Melanie Naiman.
Blog: http://www.proyectoq08.blogpsot.com/

5) Estudio de la participacion de la anandamida en la regulacion de la interaccion espermatozoide-ovioducto en un modelo bovino.
Investigador: Dra. Silvina Perez Martinez.
Instituto: Facultad de medicina - UBA.
Alumnos: Judith Arenas Tenenbaum y Melina Braverman.
Blog: http://www.scienceproject08.blogspot.com/

6) El estudio de los mecanismos moleculares involucrados en la regulación del gen UGA4 de Saccharomyces cervisiae en respuesta a cambios en la disponibilidad de nutrientes con el fin de dilucidar las distintas cascadas de señales desencadenadas por dichos nutrientes y establecer sus interconexiones.
Investigador: Dra Susana Correa García.
Instituto: Departamento de Química Biologica, Facultad de ciencias Exactas y Naturales, UBA. Alumnos: Iván Mikiej y Victoria Salama.
Blog: http://www.proyectoquimica22.blogspot.com/

7) Diagnóstico de la enfermedad de Von Willebrand (VWD) tipo 2N por técnicas fenotípicas y genotípicas.
Investigador: Dra. Adriana I. Woods.
Instituto: Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex" de la Academia Nacional de Medicina.
Alumnos: Abigail Skverer y Daniela Lin
Blog: http://www.vwd-diagnostico.blogspot.com/

8) Estudio de la mielinogenesis en el sistema nervioso periferico en condiciones fisiologicas y patologicas. Participacion de celulas pluripotentes en el proceso de degeneracion-regeneracion nerviosa.
Investigador: Dra Patricia Setton-Avruj.
Instituto: Departamento de Quimica Biologica, Facultad de Farmacia y Bioquimica (IQUIFIB-UBA-CONICET).
Alumnos: Daniel Averbuj y Eitan Rozenszajn.
Blog: http://www.proyectoaverbuj-rozenszajn.blogspot.com/

9) Diseño y desarrollo de vacunas antitumorales empleando bacterias y celulas tumorales modificadas con genes inmunomodiladores. Estudio de los mecanismos inmunes inducidos. Investigador: Claudia I. Waldner y Claudia Mongini.
Instituto: Laboratorio de inmunologia celular y molecular. Centro de Estudios Farmacologicos y Botanicos (CEFYBO. CONICET-UBA)
Alumnos: Amalia Surijon y Maria Belen Tolava Rivero.
Blog: http://www.amibeluproyecto.blogspot.com/

10) Marcadores Geneticos Asociados al Cáncer.
Investigador: Dr.Javier Hernán Cotignola.
Instituto: Laboratorio de Cáncer y Apoptosis del Departamento de Quimica Biologica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la UBA.
Alumnos: Ayelén Marano y Solange Perchik
Blog: http://www.marcadoresgeneticos.blogspot.com/

11) Expresion del canal de la conductancia transmembranal de la Fibrosis Quistica (CFTR) en placentas Preeclampticas: posible rol en la regulacion de la actividad de la Acuoporina-9 (AQP9).
Investigador: Dr Alicia E Damiano.
Instituto: Catedra de Biologia Celular, Departamento de Ciencias Biologicas, Facultad de Farmacia y Bioquimica (UBA)
Alumnos: Gabriel Colodenco y Martín Sapir.
Blog: http://www.proyectofinalcs.blogspot.com/

12) Proteómica de factores secretados por células de cáncer de mama y mama normal con capacidad inhibitoria de la producción lipídica.
Investigador: Dra.Guerra de Grignoli Liliana Noemi.
Instituto: Departamento de Ciencias biologicas. Facultad de ciencias exactas y naturales, UBA-CONICET.
Alumnos: Fabiana Durante y Tamara Broitman.
Blog: http://tyf-proyecto08.blogspot.com/

13) Estudio de la Growth Associated Protein (GAP-43), su interacción con la Ubicutina y su participación en el control del ciclo celular en células NIH3T3 transfectadas en forma estable y transiente. Efecto de la Apo-transferrina en la remielización: participación de la vía Notch en la diferenciación oligodendrioglial.
Investigador: Dra Ana M. Adamo.
Instituto: Departamento de Química Biológica Patológica, Facultad de Farmacia y Bioquímica de la UBA. CONICET.
Alumnos: Rodrigo C. Pampin y Robby Mattes.
Blog: http://www.proyectodeatuyrobby.blogspot.com/

14)Neovascularizaciòn en un modelo murino de inflamaciòn aguda inducida por LPS.
Investigador:Eulalia de la Torre.
Instituto: Facultad de Medicina - Uba - Laboratorio de Inmunofarmacologia.
Alumnos: Federico Mauas Walach y Pablo Kuleff.
Blog: http://finalproyectort.blogspot.com/

15)Interacción de sumo-1 y mage-a2 en la regulacion del oncosupresor p53
Investigador: Martín Monte
Instituto: Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA)
Alumnos: Leonel Stermann y Yair LitmanBlog: http://proyectosumo.blogspot.com/

jueves, 2 de octubre de 2008

Dia Catorce

Hoy Jueves 2 de Octubre terminamos la inmunocitoquímica que largamos el anterior Jueves, lo siguiente es el protocolo que seguimos para realizarla:

Obtención de los ESP bovinos

Las pajuelas de ESP fueron descongeladas y lavadas por centrifugación para descaratar el medio en el que esatban criopresenvados. Luego el pellet fue resuspendido en 1ml y los ESP fueron contados en una camara de Newbauer para obtener la concentración ideal ara utilizar en preparados de inmunocitoquímica (50 a 100 mil ESP/Well), despues loe ESP fueron colocados en portaobjetos para realizar la inmunocitoquímica.


Inmunocitoquímica o Inmunoohistquímica

Los ESP fueron permeabilizados con metanol 100% a -20ºC durante 10 minutos, luego fueron lavados con PBS para sacar el exceso de metanol. Posteriormente las muestras fueron tratadas con una solución de bloqueo (para bloquear los sitios de unión inespecíficos del anticuerpo secundario) conteniendo PBS-BSA (40mg/ml) durante 1 hora a temperatura ambiente. Al cabo de ese tiempo se levantó la solución de bloqueo y se incubó con el primer anticuerpo según la siguiente tabla:

1ºAnticuerpo, origen, dilución y función (orden)

- TRPV1; Conejo; 1/20; Receptor endovalinoide con sitio de unión a la AEA endógeno.

- CB1; Conejo; 1/20; Receptor de endocanabinoides sitio de unión de AEA exógeno.

- CB1; Conejo; 1/20; Receptor de endocanabinoides sitio de unión de AEA exógeno.


los cuáles fueron incubaso toda la nochea 4ºC. Despues de esta incubación, los preparados fueron lavados tres veces con PBS TWEEN 20 0.1% durante 5 minutos (para evitar uniónes inespecíficas del primer anticuerpo, sacar las uniónes láviles).

Se incubó con un segundo anticuerpo (un anti IgG de conejo hecho en cabra, acoplado a una molécula de Rodamina; Alexa 555) en una concentración de 1 /250 en PBS durante 1 hora a temperatura ambiente. Luego se hicieron tres lavados con PBS TWEEN 20 0.1% y los ESP fueron montados en una solución de PBS Glicerol 1:9.


En el B y su contraste el A se puede ver la fluorecencia del segundo anticuerpo en sus colas (también la vimos en sus cuñas, el borde de las cabezas, pero en la foto no salió), y en las imágenes C y D se ve el control negativo, donde no hay fluorecencia.

También observamos, al microscopio, células ovioductales. Estas se encontraban en movimiento por el batido ciliar y con el tienpo se irán anclando en el medio y comenzarán a extenderse. Aquí es dónde sembraremos los ESP para ver como reaccionan ante la AEA (si se capacitan o no, o si se desprenden de las células ovioductales o no).

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